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本試劑盒采用國(guó)外進(jìn)口的抗CD₃、抗CD₄和抗CD₈單抗以及美國(guó)zymed顯示系統(tǒng)組裝而成。具有特異。靈敏、穩(wěn)定、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。

一.T細(xì)胞亞群及檢測(cè)的意義

T細(xì)胞是zui重要的免疫細(xì)胞。有僅在細(xì)胞免疫中居主導(dǎo)地位，體液免疫也在T細(xì)胞的調(diào)節(jié)之下進(jìn)行。T細(xì)胞通過(guò)分泌細(xì)胞因子，對(duì)機(jī)體非特異性免疫也起重要調(diào)節(jié)作用。

T細(xì)胞表面有*的標(biāo)志性分子，成熟T細(xì)胞表面有CD₃分；輔助性T細(xì)胞（Th）和誘導(dǎo)性T細(xì)胞（Ti）表面除CD₃外還有CD₄分子；抑制性T細(xì)胞（Ts）和細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Tc）表面，除CD₃外還有CD₈分子。用相應(yīng)的特異性抗體，可以指證這些分子的存在，以此區(qū)分CD₃陽(yáng)性T細(xì)胞，CD₄陽(yáng)性T細(xì)胞和CD₈陽(yáng)性T細(xì)胞。

機(jī)體的免疫功能狀態(tài)，是由免疫細(xì)胞數(shù)量、免疫細(xì)胞活性、免疫細(xì)胞和細(xì)胞亞群之間平衡決定的。T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒，是用免疫組化方法測(cè)定T細(xì)胞數(shù)量，和CD₄/CD₈比例的。據(jù)國(guó)外多年觀測(cè)，白血病、腫瘤、自身免疫病、變態(tài)反應(yīng)、感染癥、移植排斥、造血功能障礙，均有T細(xì)胞亞群變化異常。測(cè)定T細(xì)胞亞群，有助于了解機(jī)體的免疫功能狀態(tài)，對(duì)一些疾病的診斷、分型、鑒別、預(yù)后判斷、藥物療效觀察，以及疾病的發(fā)生發(fā)展研究，均有一定的參考價(jià)值。下表是T淋巴細(xì)胞亞群在臨床中的異常變化。

二．生物素－親和素法檢測(cè)T細(xì)胞亞群的優(yōu)點(diǎn)

現(xiàn)在國(guó)內(nèi)T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒，免疫組化的顯示系統(tǒng)一般采用堿性磷酸酶橋聯(lián)酶標(biāo)法（APAAP），敏感度不高。為提高檢測(cè)效果，需提高*和第二抗體使用濃度，于是又增加了抗體的非特異性吸附，不僅增加非特異性計(jì)數(shù)，還影響染片本底的清晰。用這種方法當(dāng)*抗體質(zhì)量較差時(shí)，很難獲得準(zhǔn)確的結(jié)果，這就是當(dāng)前測(cè)定CD₄T細(xì)胞遇到的情況。

本試劑盒所用抗體系從國(guó)外進(jìn)口，顯示系統(tǒng)采用zymed公司和sigma公司底物顯色液組裝而成。主要試劑包括：3種特異性*抗體、生物素標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈親和素和底物顯色液。這種顯示系統(tǒng)因增加了生物素-親和素放大系統(tǒng)，將檢測(cè)靈敏度提高了40-60倍。在這種顯示體系中，反應(yīng)為：抗原-*抗體-第二抗體-生物素-親和素-辣根過(guò)氧化物酶。酶的顯色反應(yīng)正比于抗原的量。一個(gè)親和素分子可以結(jié)合4個(gè)生物素分子，故這是一個(gè)比二抗更大的放大系統(tǒng)。另外，由于生物素和親和素之間的親和性*，相當(dāng)抗原—抗體間的10000倍以上，所以它們結(jié)合特異、專一、和不可逆，這是使檢測(cè)靈敏度提高的另一原因。由于親和性*，*第二抗體的使用濃度降低，減少了非特異結(jié)合干擾，使染片背景更清晰。

本顯示系統(tǒng)使用AEC為底物，陽(yáng)性細(xì)胞著亮紅色，與非陽(yáng)性細(xì)胞色差對(duì)比明顯，易于觀察和記數(shù)。